参麦黄连阿胶汤对绝经综合征大鼠卵巢形态学的影响
Effects of Shenmai huanglian ejiao decoction on the ovarian morphology of rats with menopausal syndrome
摘要目的:研究参麦黄连阿胶汤对绝经综合征(MPS)大鼠卵巢形态学的影响,并初步探讨其潜在作用机制.方法:采用腹腔内注射去氧乙烯基环己烯(VCD)的方法成功构建 MPS大鼠模型.将造模成功的大鼠随机分为模型组、戊酸雌二醇组(灌胃 0.09mg/kg的戊酸雌二醇溶液)、低剂量组(8.23g/kg的参麦黄连阿胶汤)和高剂量组(32.92g/kg的参麦黄连阿胶汤),每组 15 只;另选 15 只正常大鼠作为对照组.治疗结束后计算每组大鼠的卵巢质量和卵巢指数,采用苏木精-伊红(HE)染色观察每组大鼠的组织形态学变化,流式细胞术检测每组大鼠的卵巢颗粒细胞(OGC)凋亡率,酶联免疫吸附分析(ELISA)试剂盒检测每组大鼠的血清尿促卵泡素(FSH)、黄体生成素(LH)、抗米勒管激素(AMH)、雌二醇(E2)以及白细胞介素(IL)-1 β、IL-18、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-q PCR)技术检测每组大鼠的卵巢组织中IL-1 β和IL-18 基因表达水平,蛋白免疫印迹(Western Blot)检测每组大鼠的卵巢组织中丝裂原激活的蛋白激酶 14(MAPK1 4)、V-Rel网状内皮细胞增生症病毒癌基因同源物 A(RELA)、胱天蛋白酶 8(Caspase-8)蛋白水平.结果:与对照组比较,模型组大鼠原始卵泡、初级卵泡、成熟卵泡数量减少,卵母细胞体积、颗粒细胞数量减少,卵巢质量、卵巢指数及AMH、E2 水平下降(P<0.05),OGC凋亡率、FSH、LH、TNF-α和IL-1 β、IL-18及其 mRNA 水平和 M A P K 1 4、R E L A、Caspase-8 蛋白表达升高(P<0.05);与模型组比较,戊酸雌二醇组、低剂量组、高剂量组大鼠的卵巢病理变化明显改善,卵巢质量、卵巢指数、AMH、E2 升高(P<0.05),OGC凋亡率、FSH、LH、TNF-α和IL-1 β、IL-18 及其信使核糖核酸(mRNA)水平和MAPK14、RELA、Caspase-8 蛋白表达下降(P<0.05),其中高剂量组上述指标改善更明显.结论:参麦黄连阿胶汤能够改善MPS大鼠卵巢形态学,恢复卵巢功能,缓解炎性反应,其机制可能与MAPK14/RELA/Caspase-8 途径介导的细胞焦亡有关.
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