β-catenin过表达对胰腺癌干细胞生物学特性的影响

Effects of β-catenin overexpression on biological characteristics of pancreatic cancer stem cells

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摘要目的分析β-catenin蛋白在胰腺癌干细胞恶性生物学特性维持过程中的作用及其机制.方法分离培养原代胰腺癌细胞,将胰腺癌细胞分为NC组和AD β-catenin组,NC组细胞转染阴性空载病毒,AD β-catenin组细胞转染β-catenin过表达慢病毒载体.采用流式细胞仪分析细胞株肿瘤干细胞表面标志物CD24、CD44及ESA的表达情况;分选出CD24+CD44+ESA+细胞并扩大培养,通过检测分选出细胞的成球能力、克隆形成能力、增殖能力、侵袭迁移能力、细胞周期及凋亡情况;分析β-catenin过表达对胰腺癌干细胞生物学特性的影响.结果 AD β-catenin组细胞中β-catenin mRNA和蛋白的相对表达量显著高于NC组(P=0.016,P=0.015).流式细胞仪分析结果显示,AD β-catenin组细胞中CD24+及CD24+CD44+ESA+的细胞率显著高于NC组(P<0.05).与NC组比较,AD β-catenin组胰腺癌干细胞克隆形成能力、成球能力、侵袭与迁移细胞数均显著增加(P<0.05).AD β-catenin组细胞在24 h、48 h及72 h的光密度(OD)值均显著高于NC组(P<0.05).与NC组相比,AD β-catenin组G0/G1期细胞比例显著减少(P<0.05),S期细胞比例增高(P<0.05).AD β-catenin组的细胞凋亡率显著低于NC组(P<0.05).结论 β-catenin通过提高胰腺癌原代细胞中CD24+CD44+ESA+的细胞率,促进胰腺癌干细胞成球能力,增强细胞增殖、侵袭与迁移能力,抑制细胞的凋亡,从而维持胰腺癌干细胞的恶性生物学特性.