长链非编码RNA FGD5-AS1对垂体瘤的影响及其机制研究
Study on the effect and mechanism of long non-coding RNA FGD5-AS1 on pituitary adenoma
摘要目的 探讨长链非编码RNA FGD5-AS1对垂体瘤(PA)细胞增殖、迁移、侵袭的影响,并分析其可能的作用机制.方法 体外培养人PA细胞系HPAs、RC-4BC、HP75和人星形胶质细胞系NHA,RT-PCR检测上述细胞系中FGD5-AS1和miR-15a的表达水平.取对数生长期的HP75细胞随机分为沉默组和阴性对照组,沉默组转染shRNA-FGD5-AS1,阴性对照组转染shRNA-NC,RT-PCR检测2组细胞中FGD5-AS1和miR-15a的表达水平,CCK-8实验、细胞划痕实验、Transwell实验检测2组细胞增殖、迁移及侵袭能力,Western blot检测2组细胞Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达,双荧光素酶报告基因实验验证FGD5-AS1和miR-15a的靶向关系.结果 与NHA细胞相比,HPAs、RC-4BC、HP75细胞中FGD5-AS1的表达水平显著升高(P<0.05),而miR-15a的表达水平显著降低(P<0.05).与阴性对照组相比,沉默组HP75细胞中的FGD5-AS1表达水平降低(P<0.05),miR-15a表达水平升高(P<0.05),OD值下降(P<0.05),细胞迁移及侵袭能力降低(P<0.05),Wnt3a和β-catenin蛋白表达降低(P<0.05).FGD5-AS1能特异性结合miR-15a使细胞荧光素酶活性降低(P<0.05).结论 FGD5-AS1在PA细胞中表达升高,沉默FGD5-AS1能够抑制PA细胞的增殖、迁移及侵袭,其机制与其对miR-15a的靶向调控有关.
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