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抗恶性疟原虫重组HRP-Ⅱ单克隆抗体的制备与鉴定

PRODUCTION AND IDENTIFICATION OF MONOCLONAL ANTIBODIES AGAINST RECOMBINANT HRP-Ⅱ OF PLASMODIUM FALCIPARUM

摘要采用恶性疟原虫重组富组氨酸蛋白Ⅱ(HRP-Ⅱ)融合表达蛋白免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0细胞融合,经3次ELISA筛选,共获得6株分泌抗恶性疟原虫重组HRP-Ⅱ单克隆抗体的杂交瘤细胞株(1B11、1D10、2E7、3A3、3F9、4G5),用有限稀释法进行克隆、亚克隆及扩大培养,并用杂交瘤细胞经腹腔接种BALB/c小鼠制备腹水.6株杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体 (McAb)经琼脂双扩散鉴定均为IgG1亚类,Dot-ELISA及Western blot分析显示6株McAb都能与重组HRP-Ⅱ抗原发生特异性反应,但其中只有2E7和3A3在Dipstick免疫胶体金反应中能与恶性疟原虫培养上清中的天然HRP-Ⅱ结合.

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