换一批
换一批恶性疟原虫海南分离株裂殖子表面蛋白2真核表达重组质粒的构建
CONSTRUCTION OF EUKARYOTIC EXPRESSION RECOMBINANT PLASMID EXPRESSING THE PLASMODIUM FALCIPARUM MEROZOITE SURFACE PROTEIN 2
摘要目的构建恶性疟原虫海南分离株(FCC1/HN)裂殖子表面蛋白2(MSP2)融合HBsAg基因片断真核表达质粒pVXORF1-PfMSP2-HBS及重组真核表达质粒pVXORF1-PfMSP2,为疟疾核酸疫苗及蛋白疫苗的研制奠定基础. 方法 (1)采用PCR技术对恶性疟原虫FCC1/HN株MSP2原核表达质粒PET28α-MSP2的MSP2基因进行扩增,扩增产物经纯化后用BamHⅠ酶切;质粒pVXORF1-PvMSP1.19-HBS用相同的酶酶切,经纯化后用T4DNA连接酶将其与酶切后纯化的MSP2基因连接;(2)分别用BamHⅠ+XhoⅠ双酶切PET28α-MSP2质粒DNA和pVXORF1质粒DNA,纯化后将目的基因片断用T4DNA连接酶连接;将(1)、(2)连接产物分别转化大肠杆菌DH5α.于氨苄青霉素阳性LB培养平板上筛选阳性克隆,酶切电泳鉴定. 结果筛选出的重组子为编码FCC1/HN MSP2基因片断的重组质粒pVXORF1-PfMSP2-HBS及pVXORF1-PfMSP2. 结论编码FCC1/HN MSP2基因片断真核表达质粒pVXORF1-PfMSP2-HBS和pVXORF1-PfMSP2的构建为疟疾核酸疫苗及蛋白疫苗的研制奠定了基础.
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