换一批2型猪链球菌Sao-M蛋白单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用
Preparation, identification, and preliminary use of monoclonal antibodies against the Sao-M protein of Streptococcus suis Serotype 2
摘要目的 制备并鉴定2型猪链球菌重组Sao-M蛋白的单克隆抗体(Monoclonal Antibody,McAb),为建立免疫学快速检测方法及Sao蛋白的功能研究奠定基础. 方法 用重组Sao-M蛋白免疫BALB/c小鼠,利用细胞融合技术建立稳定分泌抗Sao-M蛋白的杂交瘤细胞株,制备抗Sao单克隆抗体,采用IgG亚类鉴定试剂盒鉴定单克隆抗体的IgG亚型,采用间接ELISA法测定抗体效价.将05ZYH33与单抗共孵育,检测单克隆抗体与细菌表面具有天然构象Sao蛋白的结合能力. 结果 筛选到4株能持久、稳定分泌抗Sao蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株(分别命名为1G5、1B10、2A10、3A6),均为IgG1型,ELISA测定腹水抗体效价＞1∶102 400;4株单克隆抗体均能与05ZYH33表面天然构象的Sao蛋白结合,对细菌形态产生显著影响. 结论 成功制备高效价的抗Sao-M单克隆抗体,为建立快速检测猪链球菌感染的免疫学方法及Sao蛋白的功能研究奠定了基础.
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DOI
10.13350/j.cjpb.160704
发布时间
2016-09-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（No.81571965）
国家自然科学基金（81172794）
国家自然科学基金（81071317）
国家自然科学基金（81471920）
江苏省自然科学基金（No.BK20151091）
江苏省高层次人才培养工程"项目（No.BRA2014363）
南京军区医学科技创新项目（No.ZX39）
南京医科大学科技发展基金面上项目（No.2014NJMU117）
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