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表达HBV的肝癌细胞对巨噬细胞分化影响的初步研究

Preliminary study of the effect of hepatoma cells expressing hepatitis B virus on macrophage differentiation

摘要目的 了解表达乙型肝炎病毒(HBV)的肝癌细胞在体外环境下对巨噬细胞分化的影响.方法 收集表达HBV的肝癌细胞HepG2.215和对照肝癌细胞HepG2培养上清,联合佛波酯(PMA,50 ng/ml)刺激单核细胞THP-1分化为巨噬细胞,采用Real-time PCR(RT-PCR)检测M1型巨噬细胞分化标志HLA-DR、CD86和M2型巨噬细胞分化标志CD206、CD163的表达;采用基因芯片技术检测分化的巨噬细胞基因表达变化.结果 表达HBV的HepG2.215细胞培养上清联合PMA成功刺激THP-1分化成巨噬细胞.RT-PCR检测HepG2.215培养上清诱导的巨噬细胞CD163和CD206基因表达上调,HLA-DR基因表达小调;基因芯片的检测显示,与HepG2+ PMA比较,HepG2.215培养上清+PMA诱导形成的巨噬细胞有23个基因表达存在差异,其中6个基因表达上调,其余基因表达下调,这些表达差异的基因与基因的转录激活、信号转导、细胞代谢和免疫抑制等生物学功能相关.结论 表达HBV的肝癌细胞能诱导巨噬细胞向M2型分化,且多种基因的表达异常与HBV感染肝癌细胞诱导分化的巨噬细胞有关.

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