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阿里红多糖对小鼠腹腔巨噬细胞体外抗弓形虫感染细胞因子分泌的影响

Effects of Fomes officinalis polysaccharides on cytokine secretion of mouse peritoneal macrophages in response to a Toxoplasma infection in vitro

摘要目的 探索新疆植物药阿里红粗多糖(fomes officinalis polysaccharides,FOPS)提取物对小鼠腹腔巨噬细胞体外抗弓形虫TgRH株速殖子感染细胞因子分泌的影响. 方法 建立刚地弓形虫RH速殖子与小鼠腹腔巨噬细胞接种比例为1∶5的体外感染模型,实验设空白对照组、感染对照组和高(400 μg/ml)、中(200 μg/ml)、低(100 μg/ml)3个药物剂量的药物对照组及感染模型治疗组.以流式微球捕获芯片技术(cytometric bead array,CBA)检测各组细胞感染虫体和药物作用6、12、24、36、48 h培养上清中IL-6、IL-10、TNF、INF、IL-12p70及MCP-1细胞因子水平. 结果 各实验组培养上清中IL-10和INF在实验过程均无表达.空白对照组感染48 h时TNF-α、IL-12p70及MCP-1略升高.感染组IL-6随感染时间延长水平显著升高,至感染48 h达(881.05±6.99) pg/ml,与空白对照组比较差异有统计学意义(F=235.3,P<0.05);TNF-α至感染48h时达(292.30±2.63)pg/ml,高于空白对照组(F=52.45,P<0.05);MCP-1和IL-12p70至感染48 h时与空白对照组差异无统计学意义(F值分别为2.624和3.518,P均>0.05).各剂量FOPS作用于空白小鼠腹腔巨噬细胞,培养上清中MCP-1和TNF-α随作用时间延长而显著升高,至24 h时达到高峰,之后下降.各剂量药物组与空白对照组在药物作用24 h时组间MCP-1和TNF-α水平差异有统计学意义(F分别为41.95和231.4,P均<0.05);TNF-α表达水平与药物浓度升高成正比,MCP-1在培养上清中表达水平为M-FOP>L-FOP> H-FOP>空白对照组.高剂量H-FOP作用于感染巨噬细胞36 h内IL-6表达均较低,48 h略有升高,M-FOP组和L-FOP组IL-6表达趋势与感染对照组相似,但各感染时间IL-6表达水平均低于感染对照组(F =461.9,P<0.05).各药物组TNF-α表达水平于药物作用24 h时升高,36 h时显著降低,48 h又迅速升高,各药物组与感染对照组比较差异有统计学意义(F=163 600,P<0.05).高剂量H-FOP组作用24 h细胞培养上清中TNF-α为(1 624.426±6.54) pg/ml,较感染对照组水平升高100倍以上,略高于M-FOP组和L-FOP组,而M-FOP组与L-FOP组差异无统计学意义(F=1.396,P>0.05).各药物组MCP-1变化趋势同TNF-α,MPC-1表达水平随药物剂量升高而降低.各药物组对感染细胞MPC-1表达水平的影响显著强于对正常小鼠腹腔巨噬细胞的影响,其中L-FOP组药物作用24 h时感染细胞培养上清中MCP-1水平为(119.11±0.91)pg/ml,约为L-FOP药物对照组的2倍. 结论 阿里红多糖粗提物主要影响小鼠腹腔巨噬细胞TNF和MCP-1的表达,其中使TNF表达上调,时间持续至给药后24 h.而MCP-1的上调可能与阿里红多糖粗提物中的其他成分有关.

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