换一批
换一批人IL-2与EB病毒BZLF1融合基因重组BCG的构建及免疫学研究
Construction and immunological study of recombinant BCG with a fusion gene cosisting of human IL-2 and EB virus BZLF1
摘要目的 构建人 IL-2与 EB 病毒(Epstein-Barr virus,EBV)基因 BZLF1 的融合基因重组 BCG(recombinant BCG,rBCG),并分析其免疫效果.方法 通过重叠延伸技术,构建融合基因ILBZ,将ILBZ与穿梭表达载体pMV261连接并转化至BCG中进行表达.注射rBCG至C57BL/6J小鼠体内,通过流式细胞术检测和CTL检测分析其免疫反应;注射rBCG至构建的人源性EBV阳性肿瘤的BALB/c-nu裸鼠中,观察rBCG对肿瘤的治疗效果.结果 重叠延伸PCR获得的融合基因ILBZ为1248 bp;Western blot检测rBCG表达的融合蛋白能被IL-2抗体和ZEBRA抗体识别,大小约55 ku;动物免疫试验显示,注射rBCG的小鼠CD4(1)T细胞和CD81 T细胞百分率分别为45.1％和32.3％,高于BCG(28.5％和24.0％)及PBS的百分率(21.3％和18.1％)(P＜0.05);动物治疗实验显示,注射rBCG治疗的裸鼠NK细胞占2.99％,高于BCG(NK细胞为1.89％)和PBS(NK细胞为0.68％)(P＜0.05);rBCG注射2周,EBV阳性小鼠肿瘤体积和重量明显小于对照组.结论 成功构建rBCG并表达出稳定的融合蛋白,且rBCG能刺激小鼠产生免疫反应,具有抗肿瘤作用.
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分类号
R373
栏目名称
DOI
10.13350/j.cjpb.220109
发布时间
2022-04-28
基金项目
山东省重点研发计划项目（No.2018GSF118137）；
山东省医药卫生科技发展计划项目（No.2017WS339）；
山东省高等学校科技计划项目（No.J17KB085）；
济宁市重点研发计划项目（No.2019SMNS020）；
济宁医学院重点项目（No.16008）；
贺林院士工作站重点项目（No.JYHL2019ZD03）；
济宁医学院大创项目（No.CX2019102）
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