换一批
换一批犬贾第虫携病毒株体外纯培养的建立
Establishment of In vitro Cultivation of Giardia canis Trophozoites Infected with Giardia canis Virus
摘要目的 培养一携带犬贾第虫病毒的犬贾第虫(Giardia canis)细胞株.方法 用蔗糖密度梯度离心-G1耐酸漏斗过滤法纯化犬贾第虫包囊,经口接种5日龄长爪沙鼠(Meriones unguiculata),8 d后于其十二指肠无菌收集犬贾第虫滋养体,置改良的TYI-S-33培养基中培养,待滋养体在培养管壁上形成细胞单层后进行传代.同时进行冻存和复苏实验,以及纯度、稳定性、细胞生物学特性、微生物污染等4项指标检测.滋养体经液氮冻融3次后3 000×g离心15min,取上清,用磷钨酸负染,透射电镜观察病毒粒子.结果 犬贾第虫滋养体接种14 d后虫体逐渐适应了培养环境,在培养管壁上形成细胞单层,经上述4项指标检测,证明形成了稳定的犬贾第虫细胞株.电镜观察,见滋养体内有外观球形呈20面体结构、直径约为36 nm的病毒样粒子.结论 建立了携带GCV的犬贾第虫细胞株的体外纯培养.
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