约氏疟原虫感染小鼠树突状细胞对Th17分化和功能的调控作用

The regulatory effect of dendritic cells on Th17 cell differentiation and function in mouse infected with Plasmodium yoelii

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摘要目的探讨约氏疟原虫(Plasmodium yoelii)17XL株(Py17XL)感染小鼠过程中树突状细胞(DCs)对辅助性T细胞17型(Thl7)细胞分化和功能的调控作用及机制. 方法将12只雌性BALB/c小鼠随机分为感染组(Py17XL)、Toll样受体4(TLR4)阻断组(Py17XL+TLR4)、Toll样受体9(TLR9)阻断组(Py17XL+ TLR9)和TLR4联合TLR9阻断组(Py17XL+ TLR4+ TLR9),每组3只.感染前1d,腹腔注射10μg抗-TLR4单抗(TLR4阻断组)或50 μg抗-TLR9单抗(TLR9阻断组)阻断DCs的功能,注射体积为0.4 ml,对照组注射等量的PBS.4组小鼠均腹腔注射1×106 Py17XL感染的红细胞.感染后第0、3和5天计数红细胞感染率,同时制备脾细胞悬液,流式细胞仪检测脾脏细胞中CD1 1c+ TLR9+和Th17细胞数量变化,ELISA检测脾细胞培养上清中干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-10(IL-10)水平的变化. 结果流式细胞仪检测表明,DCs阻断模型构建成功.感染后第5天,感染组、TLR4阻断组、TLR9阻断组和TLR4联合TLR9阻断组小鼠原虫血症分别为28.0％、29.0％、31.0％和16.3％;感染后第7天,原虫血症分别为43.3％、47.5％、32.5％和8.0％,感染组和TLR4阻断组小鼠全部死亡,其余阻断组小鼠于感染后第6天开始出现死亡.与感染组比较,TLR9阻断组和TLR4联合TLR9阻断组小鼠原虫血症上升缓慢,生存期明显延长至11 d和15 d.流式细胞仪检测结果显示:感染后第5天,TLR9阻断组和TLR4联合TLR9阻断组Th17细胞数量分别为1.2％和1.4％,与感染组(1.9％)相比,数量明显减少(P＜ 0.05,P＜0.01).ELISA检测结果显示:感染后第5天,TLR4联合TLR9阻断组小鼠IFN-γ和IL-10水平分别为(232.4±15.5) pg/ml和(1 791.2±58.2) pg/ml,与感染组[(90.7±50.1) pg/ml和(962.6±409.0) pg/ml]相比,差异有统计学意义(P＜ 0.05,P＜ 0.01). 结论 Py17XL感染小鼠过程中DCs调控了Thl7细胞的分化和功能.DCs阻断(Py17XL+ TLR4+ TLR9)后,感染小鼠原虫血症降低,生存期延长.