换一批
换一批摘要合成PCR和LAMP引物,分别扩增体外纯培养的阴道毛滴虫虫体DNA,建立阴道毛滴虫PCR和LAMP检测方法.通过检测临床镜检阴道毛滴虫阳性和阴性的阴道分泌物样品各40份,比较两种方法在临床应用的可行性;通过扩增解脲支原体、蓝氏贾第鞭毛虫、金黄色葡萄球菌、白假丝酵母菌、大肠埃希菌等的DNA,评价2种方法的特异性;测定体外纯培养的阴道毛滴虫虫体DNA浓度,经倍比稀释后,评价2种方法的灵敏度.结果 显示,阴道毛滴虫DNA扩增后,PCR方法可检测出263 bp特异条带;LAMP方法显示扩增体系颜色由红色变为黄色,琼脂糖凝胶电泳可见DNA梯状条带.可行性检测结果显示,PCR检测40份临床阴道毛滴虫阳性样品和40份阴性样品的符合率分别为100％和100％,LAMP方法的符合率分别为100％和97.5％.特异性检测结果显示,2种方法均无法扩增其他5种病原体的DNA.灵敏度检测结果显示,PCR和LAMP方法的检测下限分别为0.5006 ng/μl和0.05006 ng/μl.提示PCR和LAMP技术都可用于阴道毛滴虫的检测,两种方法的特异性都较高,LAMP方法的灵敏度优于PCR方法.
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