GDF-5在小鼠肢体骨骼发育中的表达及对肢芽细胞影响的研究
Expression of GDF-5 during the development of limb skeleton system of mice and the effect of GDF-5 on limb bud cell
摘要目的:初步观察并探讨生长分化因子-5(GDF-5)在小鼠肢体发育过程中的表达及对肢芽细胞软骨分化的影响.方法:RT-PCR法检测小鼠肢体发育过程中GDF-5表达的变化情况;MTT法测定不同浓度GDF-5对体外微团培养肢芽细胞增殖率的影响;Alcian染色在倒置相差显微镜下观察不同浓度GDF-5对肢芽细胞软骨分化的影响,探讨GDF-5影响骨骼系统发育的机理.结果:RT-PCR结果提示GDF-5在胚胎发育的第12、13d高表达,骨骼系统基本形成之后在孕14、15d表达渐下降稳定于一较低水平;不同浓度GDF-5对肢芽细胞增殖率影响不同,50ng/ml浓度组促肢芽细胞增殖作用最强;Alcian染色结果显示GDF-5促进肢芽细胞软骨分化的作用呈剂量依赖效应,以120ng/ml组软骨分化最快,软骨结节体积最大,100ng/ml组软骨结节的数量最多.结论:GDF-5在肢体发育的不同阶段表达水平不同,在骨骼系统形成早期及关节系统形成阶段表达最强,主要通过影响肢芽细胞增殖及软骨分化而发挥作用.
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