换一批Real-Time PCR检测间充质干细胞源性内皮细胞eNOS、Tie-2基因表达
Real - time quantitative RT - PCR for measurement of expression of eNOSmRNA and Tie - 2mRNA in BMSCs -derived Endothelial Cells
摘要[目的]检测骨髓间充质干细胞(BMSCs)源性内皮细胞功能基因表达水平,为骨组织工程血管化奠定基础.[方法]采用全骨髓贴壁法对BMSCs进行体外培养、纯化和扩增,用含有VEGF(10 ng·ml~(-1))和bFGF(2 ng·ml~(-1))的诱导培养液对其进行体外诱导分化3周,通过透射电镜观察内皮细胞特异性W-P小体鉴定细胞性质.以主动脉内皮细胞(VECs)为阳性对照,采用实时定量PCR(RT-qPCR)检测BMSCa源性内皮细胞一氧化氮合酶(eNOS)与酪氨酸激酶受体(Tie-2)mRNA的相对表达量.[结果]分化后的细胞在光镜下具有内皮细胞的形态学特征;透射电镜观察显示诱导后的细胞内出现内皮细胞特异性W-P小体.RT-qPCR检测显示:实验组Tie-2mR-NA的相对表达量为0.785,eNOS mRNA的相对表达量为0.747,二者与阳性对照组目的基因的表达量没有明显差异(P>0.05).[结论]BMSCs能够成功体外分化为内皮细胞,且具有成熟内皮细胞功能基因的表达,是构建血管化组织工程骨的理想种子细胞.
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关键词
间充质干细胞内皮细胞RT-qPCR基因表达mesenchymal stem cellsendothelial cellsreal - time quantitative reverse transcriptase PCRgene expression
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2010-03-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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