猪跟腱止点纤维软骨细胞的分离、体外培养及鉴定
Isolation, cultivation and identification method of fibrochondrocytes from fibrocartilaginous enthesis of the Guizhou mini pig's achilles
摘要[目的]探讨猪跟腱止点纤维软骨层细胞的分离、培养及鉴定方法,观察纤维软骨细胞的生物学特性.[方法]体视显微镜下切取贵州迷你小香猪跟腱止点纤维软骨层组织并剪碎,经过胰蛋白酶和Ⅱ型胶原酶两步酶消法,后在含10% FBS的DMEM进行培养和传代,使用HE、阿利新蓝、Ⅰ、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色鉴定.[结果]成功分离获得纤维软骨细胞.鉴定证实实验细胞具有纤维软骨细胞共同生物学特性.HE染色:细胞浆蛋白多糖成分被染成深浅不同的粉红色;阿利新蓝染色:纤维软骨细胞内见蓝紫色异染颗粒,细胞核深染,细胞周围有少量异染颗粒出现.Ⅰ、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色:纤维软骨细胞胞质被染成棕黄色.[结论]成功分离和培养了猪跟腱止点纤维软骨层细胞,针对纤维软骨细胞特性,通过不同染色方法进行了联合鉴定.本实验建立的腱止点纤维软骨细胞分离、培养方法是一种简便可靠的方法.
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