兔髓核间充质干细胞与髓核细胞非接触式共培养的生物学效应
Biological effects of non-contact coculture of rabbit-derived nucleus pulposus mesenchymal stem cells and nucleus pulposus cells
摘要[目的]通过非接触式共培养探索兔髓核间充质干细胞(NPMSCs)与兔髓核细胞(NPCs)的间接生物学效应.[方法]将第3代兔来源NPMSCs与NPCs进行非接触共培养,分设三组:NPCs/NPCs自身共培养对照组,NPMSCs/NPMSCs自身共培养对照组,NPMSCs/NPCs共培养组.分别在共培养3、5、7d后,比较两种细胞增殖情况,ELISA检测上清液中转化生长因子β1(TGF-β1)、胰岛素样生长因子(IGF)的含量;采用RT-PCR检测共培养7d后NPMSCs与NPCs的Col Ⅱc1、AGG基因表达变化;免疫荧光染色检测NPMSCs中Col Ⅱ的蛋白表达情况.[结果]在共培养第5d和第7d,共培养组NPCs的细胞数量均高于自身对照组(P<0.05),在第7d,共培养组NPMSCs的细胞数量均高于自身对照组;在共培养3、5、7d后,共培养组上清液TGF-β1、IGF的含量均高于自身对照组(P<0.05);在培养7d后,共培养组NPMSCs中Col Ⅱ免疫荧光强度高于自身对照组,NPCs与NPMSCs的Col Ⅱa1、AGG基因的表达较自身对照组显著升高(P<0.05).[结论]NPMSCs与NPCs非接触共培养可以促进细胞因子分泌、细胞增殖、基质合成与分泌.
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