LncRNA HIF1A-AS2对人骨髓间充质干细胞的影响

Effects of LncRNA HIF1A-AS2 on human bone marrow mesenchymal stem cells

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摘要[目的]探讨LncRNA HIF1A-AS2对骨髓间充质干细胞成骨分化的作用及机制.[方法]人骨髓间充质干细胞(hu-man bone marrow mesenchymal stem cells,hMSCs)分为6组,为空白组、骨诱导组、AS2NC过表达组、AS2过表达组、AS2 NC干扰组、AS2干扰组.后4组分别体外转染相应的LncRNA HIF1A-AS2的慢病毒载体,再将除空白组外的hMSCs进行成骨诱导培养.检测细胞凋亡、细胞增殖和细胞钙化沉积情况.检测HIF1A-AS2、MMP2和VEGF165 mRNA的表达水平及MMP2和VEGF165蛋白的表达水平.[结果]RT-PCR结果显示,成骨诱导分化最强时间点为7 d.细胞凋亡率由高至低依次为,空白组＞AS2干扰组＞AS2NC过表达组＞AS2NC干扰组＞骨诱导组＞AS2过表达组,整体差异有统计学意义(P＜0.05).细胞增殖OD值由低至高依次为:空白组＜AS2干扰组＜AS2 NC干扰组＜骨诱导组＜AS2 NC过表达组＜AS2过表达组,整体差异有统计学意义(P＜0.05).AS2过表达组的红色钙化结节沉积较为显著,AS2干扰组的红色钙化结节沉积数量相对较少.AS2过表达组的MMP2和VEGF165的mRNA和蛋白表达水平显著高于AS2干扰组(P＜0.05).[结论]LncRNA HIF1A-AS2过表达会促进细胞增殖,抑制细胞凋亡,增加MMP2和VEGF165的表达水平,促进hMSCs细胞分化为成骨细胞.