换一批禽流感病毒H5N1的重组酶介导检测方法学研究
Rapid Detection of H5N1 Avian Influenza Virus Based on RAA Fluorescence Assay
摘要采用逆转录-重组酶介导核酸扩增技术(Reverse Transcription Recombinase-aided amplification,RT-RAA)建立检测禽流感病毒H5N1的快速方法.根据禽流感病毒H5N1保守序列设计引物及探针,将H5N1RNA逆转录为cDNA,然后以cDNA作模板,扩增检测病毒核酸序列.本研究构建了带有H5N1核酸序列的质粒,以此为模板检测不同浓度的质粒,分析该方法的灵敏度,对已知样本进行检测来验证方法的特异性.设计的H5N1特异性引物和探针,能在39℃C恒温下,10～30 min可有效扩增出相应病毒的核酸,与其他流感病毒无交叉反应;对质粒的检测灵敏度可达10拷贝.建立的RT-RAA检测禽流感病毒H5N1方法灵敏度和特异性均较高,且该方法操作简单,适用于禽流感病毒H5N1的快速检测.
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DOI
10.3969/j.issn.1002-4689.2021.03.001
发布时间
2021-05-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
海关总署科研项目（2019HK139）
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