IGF-1抑制SIRT1表达与活性介导椎间盘纤维环细胞衰老的机制研究
IGF-1 induced intervertebral disc annulus fibrosus cell aging through the inhibition of SIRT1 activity
摘要目的:探讨胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)通过调控沉默信息调节因子sirtuin 1(SIRT1)活性介导椎间盘细胞衰老的机制.方法:选取8周龄Spargue-Dawley(SD)雌性大鼠,分离椎间盘组织,体外培养椎间盘纤维环(annulus fibrosus,AF)细胞,加入不同浓度外源IGF-1(0、1、10、50、100ng/mL)进行培养,通过β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色、细胞增殖实验、细胞迁移实验等实验检测不同浓度IGF-1对AF细胞的影响,并通过Western blot进一步探讨IGF-1通过调控SIRT1活性介导AF细胞衰老的分子机制.结果:不同浓度外源IGF-1处理后,SA-β-Gal染色和Western blot结果均显示IGF-1呈浓度依赖性AF细胞衰老;CCK-8实验显示低浓度IGF-1促进AF细胞的增殖较为明显;Transwell实验结果表明低浓度IGF-1可以促进AF细胞的迁移,而高浓度IGF-1对AF细胞的迁移能力没有显著影响;Western blot结果进一步表明IGF-1可以下调SIRT1的表达,并促进p53蛋白的乙酰化.结论:IGF-1可通过抑制SIRT1的表达和活性促进AF细胞的衰老.
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