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沉默ski基因对大鼠星形胶质细胞迁移的影响

Effect of Knocking Down ski on Migration of Astrocytes in Rats

摘要目的 研究ski基因在大鼠星形胶质细胞迁移过程中的作用.方法 分离大鼠脑皮质星形胶质细胞,体外培养.合成ski基因和阴性对照小干扰片段.设置ski-siRNA转染组、阴性对照组和空白对照组.采用脂质体法将特异性针对ski基因的siRNA和阴性对照siRNA转入大鼠星形胶质细胞.采用Western blotting检测各组ski蛋白的表达水平;采用Transwell细胞迁移实验和细胞划痕实验检测ski-siRNA转染后星形胶质细胞迁移能力的变化.结果 与空白对照组和阴性对照组比较,ski-siRNA转染组细胞内ski蛋白的相对表达水平显著降低(F=132.957,P<0.001).Transwell细胞迁移实验发现,ski-siRNA转染组每孔迁移细胞数少于空白对照组和阴性对照组(F>47.197,P<0.05).细胞划痕实验显示,转染组细胞1~5 d的划痕愈合率均明显低于对照组(F>69.187,P<0.01).结论 沉默ski基因能显著抑制星形胶质细胞的迁移能力,ski可能参与星形胶质细胞的转移过程,进而调控胶质瘢痕的形成.

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