mNGF联合康复训练对痉挛型脑性瘫痪仔鼠脑组织BDNF、Caspase-3表达的影响
Effects of mNGF combined with rehabilitation training on the expression of BDNF and Caspase-3 in brain tissue of neonatal rats with spastic cerebral palsy
摘要目的:分析鼠神经生长因子联合康复训练对痉挛型脑瘫仔鼠脑组织BDNF、Caspase-3表达的影响.方法:7日龄清洁级SD大鼠150只采用随机数字表法分为对照组(NS组,n=40)和模型组(T组,n=110).T组于7日龄左侧颅内锥体束定向注射无水乙醇(1μl/g),NS组左侧颅内锥体束定向注射等量生理盐水.各组均在注射24h后(8日龄),采用改良李晓捷等脑瘫仔鼠模型判定标准结合Longa评分法判定痉挛型脑瘫仔鼠模型,将造模成功的T组SD大鼠采用随机数字表法选取90只,并分为A1、A2、A3组,每组30只.造模当日记为实验第0天,于实验第1天(8日龄)开始干预,A1组给予肌肉注射mNGF(30ng/g/d),A2组给予肌肉注射等量mNGF并联合康复训练,A3组给予肌肉注射等量生理盐水(2.27ml/kg/d).干预至21日龄.NS组给予肌肉注射等量生理盐水.于8、14、21日龄进行HE染色动态观察脑组织内囊区细胞形态学的改变,TUNEL染色动态观察脑组织内囊区细胞凋亡率的改变,Western Bolt检测动态观察脑组织海马区BDNF及Caspase-3蛋白表达量的改变.结果:模型制备:采用改良李晓捷等脑瘫仔鼠模型判定标准结合Longa评分法,8日龄T组仔鼠共判定痉挛型脑瘫仔鼠97只,NS组无脑瘫仔鼠.TUNEL染色:A1、A2、A3组各日龄仔鼠细胞凋亡率明显高于NS组(P<0.01),14、21日龄A3组明显高于A1、A2组(P<0.01),且A1组明显高于A2组(P<0.01).Western Blot:14日龄A1、A2、A3组各日龄仔鼠BDNF、Caspase-3蛋白相对表达量均高于NS组(P<0.05),A1、A2组BDNF蛋白相对表达量高于A3组(P<0.05),A2组高于A1组(P<0.05),21日龄A2组与A1组比较无显著性差异(P>0.05);A1、A3组Caspase-3蛋白相对表达量高于A2组(P<0.05),A3组明显高于A1组(P<0.05).结论:推测mNGF及联合康复训练均可通过促进BDNF蛋白表达降低Caspase-3的活性而抑制神经细胞凋亡,mNGF联合康复训练的效果优于单独应用mNGF.
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