生理周期性牵张应力促进人类膀胱平滑肌细胞增殖分子机制的研究
Physiological cyclic stretch induced proliferation of human bladder smooth muscle cells via PI3K-SGK1-Kv1.3 pathway
摘要目的:探索不同模式的牵张应力条件促进人类膀胱平滑肌细胞(human bladder smooth muscle cells,HBSMCs)增殖能力的生物学效应,以及这一过程背后的分子生物学机制.方法:将HBSMCs接种到硅胶膜上,对其施加单轴拉伸应力,其应变参数分别为2.5%,5%,10%和15%,牵张频率参数分别为0.05,0.10,0.20,0.50,1.00 Hz,并设置无应力施加的对照组进行研究.采用溴-脱氧尿嘧啶(bromodeoxyuridine,BrdU)掺入法量化分析细胞的增殖能力,摸索最适合HBSMCs增殖的牵张模式.采用实时PCR(real-time PCR,RT-PCR)技术和Western blotting技术分别从分子水平和蛋白质水平检测生理周期性牵张应力条件下HBSMCs的PI3K、SGK1、Akt、Kv1.3分子表达情况,以进一步研究应力促进细胞增殖的分子机制.结果:最适合HBSMCs增殖的牵张应力参数为应变5%、牵张频率0.10 Hz,因该试验组的细胞增殖参数较其他各试验组和对照组更高,其结果具有统计学意义(P<0.05).与对照组相比,牵张试验组的PI3K、SGK1、Kv1.3表达量显著升高(P<0.05),而Akt则无明显改变(P>0.05).分别应用SGK1和Kv1.3的阻滞剂重复细胞牵张试验均可消除上调的增殖能力.结论:周期性牵张应力可以促进HBSMCs增殖,其力学分子生物学信号可能通过PI3K-SGK1-Kv1.3通路转导,而PI3K-Akt通路并未参与其中.
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