换一批反义RNA下调parE基因对大肠埃希菌生长及新生霉素敏感性的影响
Effect of antisense RNA mediated parE downregulation on bacterial growth and sensitivity to novobiocin of Escherichia coli
摘要目的 利用反义RNA技术下调菌体内parE的表达水平,考察parE基因下调对大肠埃希菌生长以及新生霉素敏感性的影响.方法 应用反义RNA基因沉默技术,首先构建靶向parE的反义RNA菌株,下调parE基因的表达;然后过表达回补parE基因,根据生长表型判断parE基因对菌体生长以及药物敏感性的影响,通过FIC指数测定进一步判断parE基因沉默与新生霉素药物敏感性的相关性.结果 构建了一株反义RNA菌株E.coli DH5α/pHNparE,其生长速率跟反义诱导剂IPTG浓度呈反比,且对新生霉素药物敏感性增加,而对其他药物敏感性无变化;回补的parE基因能够缓解菌体生长受抑制现象,并对新生霉素的敏感性降低,部分抑菌浓度指数(FICI)小于0.5,表明反义菌株的沉默与新生霉素之间具有协同作用.结论 E.coli中parE基因的下调会抑制菌体的生长,并增加菌体对新生霉素的药物敏感性.
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