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新磷氮霉素A生产菌Streptomyces auratus AGR0001的遗传操作研究

Genetic manipulation in neophoslactomycin A producer Streptomyces auratus AGR0001

摘要目的 建立新磷氮霉素A产生菌金黄色链霉菌AGR0001(Streptomyces auratus AGR0001)的遗传操作体系,为阐明其生物合成的调控和后修饰机制,并通过遗传改造提高其产量和获得更多的新化合物奠定基础,同时可为其它链霉菌的遗传操作研究提供新的参考.方法 筛选了S.auratus AGR0001生长、产孢的最佳培养基,检测了其对11种不同抗生素的敏感性,探索了将外源DNA导入该菌的最适方法.结果 ISP4和MS培养基分别是S.auratus AGR0001的最佳产孢和生长培养基;该菌对壮观霉素等7种抗生素敏感,对氨苄和羧苄西林具有抗性,对萘啶酮酸和阿伯拉霉素在低浓度有抗性,而在高浓度敏感;使用PEG介导的原生质体转化、电转菌丝体、接合转移等方法均能将外源DNA导入S.auratus AGR0001中.利用接合转移将携带透明颤菌血红蛋白基因vhb(Vtreoscilla hemoglobin)的自杀型质粒pSET152导入S.auratus AGR0001中并整合至其染色体上进行表达,提高了发酵液的抗真菌活性.结论 建立了S.auratus AGR0001的遗传操作体系.

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DOI 10.3969/j.issn.1001-8689.2016.07.007
发布时间 2016-08-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
基金项目
国家自然科学基金(No.31260018,No.31200066;No.21162039) 云南省应用基础研究计划(No.2012FB115) 云南大学中青年骨干教师培养计划(No.XT412003)
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中国抗生素杂志

中国抗生素杂志

2016年41卷7期

524-530,540页

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