固定化青霉素G酰化酶合成头孢氨苄过程中酶活稳定性研究
Study on the enzymatic activity stability of penicillin G acylase during the process of enzymatic synthesis of cephalexin
摘要目的 改善固定化青霉素G酰化酶(PGA)的酶活稳定性,从而提高其重复使用次数.方法 采用模拟法,研究了酶法合成头孢氨苄过程中影响PGA酶活稳定性的一些主要因素.结果 7-氨基-3-脱乙酰氧基头孢烷酸(7-ADCA)、苯甘氨酸甲酯(PGM)对固定化PGA表现出了很强的底物抑制作用,而且它们的抑制作用与其浓度几乎无关.固定化PGA加入到7-ADCA、PGM溶液后,其酶活迅速降低,但反应时间超过12h后,PGA酶活几乎保持恒定不变.头孢氨苄对固定化PGA表现出了产物抑制作用,这种抑制作用主要是由其水解产物造成的.随着与头孢氨苄反应时间的延长,固定化PGA的酶活一直持续降低.当控制反应温度≤30℃时,固定化PGA表现出良好的酶活稳定性.当酶反应液pH值为6.5时,固定化PGA酶活稳定性最好.结论 合理控制头孢氨苄合成反应条件能够有效改善固定化PGA酶活稳定性.
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