新型常压室温等离子体-紫外复合诱变选育埃莎霉素Ⅰ高产菌株
Breeding of high isomycin-Ⅰ-producing strain by MPMS composite mutagenesis with plasma and UV
摘要目的 通过对埃莎霉素Ⅰ产生菌WSJ-IA进行诱变选育研究,以期获得埃莎霉素Ⅰ高产菌株.方法 使用多功能等离子体诱变系统(multifunctional plasma mutagenesis system,MPMS)对出发菌株的孢子进行等离子体和紫外复合诱变,设定不同的诱变时间处理孢子悬液,通过致死率确定合适的诱变条件,利用突变株摇瓶发酵效价筛选出正突变菌株.结果 在MPMS射频功率为100W,处理距离5mm,气体流量12.5SLM,等离子体-紫外辐射时间为50s时,菌株致死率为96.08%.在此诱变条件下,以突变株的初筛效价为指标的突变率、正突变率分别达到63.96%和22.52%,复筛效价是出发菌株1.5倍以上的有5株,占复筛菌株的9%.最终筛选出一株发酵单位比出发菌株提高221%、埃莎霉素Ⅰ组分含量提高192%的正突变株IA-425.42L自动发酵罐发酵结果表明,该菌株埃莎霉素Ⅰ产量达到(2000±200) μg/mL左右.结论 新型等离子体复合紫外诱变方式,可有效提高菌株的埃莎霉素Ⅰ发酵产量和组分含量.这为埃莎霉素Ⅰ的大规模发酵和临床前研究奠定了良好基础.
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