摘要目的 通过研究东莞地区的耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌(carbapenem-resistant Enterobacteriaceae,CRE)的耐药情况和基因分型,研究耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP)的亲缘性、耐药机制和blaKPC-2基因环境,为临床寻找控制和治疗该致病菌的更优方案提供参考.方法 回顾性收集2016年1月—2018年12月东莞市人民医院、东莞东华医院、康华医院、东莞市中医院和东莞市妇幼保健院等十三所医院的住院患者的CRE菌株进行常规微生物培养、鉴定和药敏试验.以美罗培南或亚胺培南纸片法(K-B法)或最小抑菌浓度(MIC)测定法对肠杆菌目细菌进行初筛;采用改良Hodge试验、亚胺培南-EDTA双纸片协同试验和CIM试验检测CRE产酶情况;聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测并鉴定CRE的碳青霉烯类耐药基因(blaKPC、blaNDM、blaIMP、blaDHA、blaCTX-M和blaCMY),以及CRKP的多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)和孔蛋白(OmpK35、OmpK36和OmpK37);通过Junction PCR、Mapping PCR和Crossing PCR检测blaKPC-2基因环境;使用WHONET 5.6软件统计分析CRE临床分离株在标本和科室中的分布与耐药情况,以及碳青霉烯酶基因在科室中的分布情况.结果 从37217株肠杆菌目细菌中共检出131株CRE(占0.35％),其中肺炎克雷伯菌79株(占60.31％)、大肠埃希菌21株(占16.03％)和阴沟肠杆菌12株(占9.16％);检出CRE的临床科室主要为ICU(66株,占50.38％);在检出CRE的标本中,位于前3位分别是痰液标本(56株,占42.75％)、尿液标本(21株,占16.03％)、伤口分泌物标本(12株,占9.16％);CRE对目前临床中常使用的抗菌药物表现出高耐药性,仅对阿米卡星耐药率较低,为21.38％.检测104株CRE(包括肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌和阴沟肠杆菌)发现的碳青霉烯酶有KPC-2型(57,54.81％)、NDM-1型(7株,6.73％)和NDM-5型(2株,1.92％);其中,CRKP主要为ST11型(49株,占62.03％),其次为ST1 型(25株,占31.65％);ompK35(75株,占94.94％)、ompK36(77株,占97.47％)和ompK37(79株,占100％)发生突变的占比高;blaKPC-2的基因环境主要为B1型突变型(38株,占48.10％),其次为A型突变型(14株,占17.72％).结论 2016-2018年东莞地区临床CRE检出率为0.35％,耐药性强,其中,CRKP主要为ST11型,主要流行的是KPC-2型,其基因环境为B1型突变型,而且孔蛋白突变占比极高,这提示东莞地区blaKPC-2基因主要通过质粒进行传播,并且孔蛋白突变在CRE中发挥重要作用,院内感染医务工作者应根据该菌科室分布、耐药情况和耐药机制等特点,采取合理有效的预防和治疗方法.