cphA基因特异性介导维氏气单胞菌碳青霉烯耐药的初步研究
The preliminary study on carbapenem resistance specifically mediated by cphA in Aeromonas veronii
摘要目的 探究cphA基因对维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)β-内酰胺耐药性的影响,解析基因功能.方法 以维氏气单胞菌C4为研究对象,采用同源重组方法构建cphA基因敲除株:利用比浊法测定生长曲线,微量二倍稀释法检测不同β-内酰胺类抗生素对菌株的最小抑菌浓度,实时荧光定量PCR法测定cphA基因对抗生素的响应表达;并通过分子对接解析CphA酶与抗生素互作的重要活性位点.结果 成功构建cphA基因敲除株,发现cphA基因缺失不影响维氏气单胞菌生长.虽然cphA基因在碳青霉烯类和青霉素类抗生素处理下均响应性表达增加,但cphA基因缺失仅特异性导致菌株对碳青霉烯类药物由耐受变为敏感,而对其他β-内酰胺类的药物敏感性表型并无影响.此外,分子对接结果表明,CphA酶的Thr135、His174、Asn201氨基酸残基是与亚胺培南分子形成氢键作用的位点.结论 维氏气单胞菌中的cphA基因特异性介导碳青霉烯耐药.本研究为进一步完善维氏气单胞菌的耐药研究和β-内酰胺酶的功能研究提供了一定的理论基础.
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