附子多糖的提取纯化、结构表征及其对RAW 264.7巨噬细胞免疫活性的影响

Extraction,purification,structural characterization of polysaccharide from Aconiti Lateralis Radix Praeparata and its biological evaluation on immune activity of RAW 264.7 cells

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摘要目的探讨附子多糖(Aconiti Lateralis Radix Praeparata polysaccharide,ACP)的结构特征及其对RAW264.7细胞的免疫活性影响.方法采用水提醇沉的方法获得附子粗多糖,通过阴离子交换色谱柱和分子筛凝胶色谱柱对附子粗多糖进行分离、纯化,获得ACP.采用高效凝胶渗透色谱法测定ACP的分子量分布;采用离子色谱法测定ACP的单糖组成;采用甲基化实验及核磁图谱解析ACP的糖苷键类型及多糖一级结构.最后,通过体外细胞实验,测定ACP对于RAW 264.7细胞的作用.结果与结论从附子中分离得到一种分子量为11.37 kDa的均一多糖,该多糖主要由葡萄糖组成,且以→4)-Glcp-(l→糖苷键为主链的结构,端基Glcp-(1 →为支链经→4,6)-Glcp-(1→的O-6链接到主链.体外细胞实验结果表明,ACP能够促进诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、白介素-1β(IL-1β)、IL-6及肿瘤坏死因子(TNF-a)分泌,具有一定的免疫活性.