换一批基于菌群拮抗原理治疗多重耐药肺炎克雷伯菌感染的实验研究
Experimental study on the treatment of multidrug-resistant Klebsiella pneumoniae infection based on the principle of microbiota antagonism
摘要目的 探究铜绿假单胞菌拮抗多重耐药肺炎克雷伯菌的作用及其机制,以期为临床治疗多重耐药肺炎克雷伯菌感染提供实验依据.方法 收集本院临床分离的4株铜绿假单胞菌(PA)和1株多重耐药肺炎克雷伯菌(MDR-KP8),建立两种菌共培养模型和平板互作模型,观察两者间的互作关系;收集菌株上清液,盐酸-氯仿、硫酸-蒽酮法对绿脓素和鼠李糖脂进行初步提取和定量,探究PA与MDR-KP8共培养的变化;硅胶吸附法和高效液相色谱法对绿脓素进行纯化和定量,肉汤稀释法测定绿脓素对MDR-KP8的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),评价绿脓素的抗菌活性:碱性磷酸酶试剂盒、傅里叶红外光谱(FTIR)法探究绿脓素对MDR-KP8作用机理.结果 共培养4 d,4株PA菌落数均多于MDR-KP8菌落数;平板互作实验显示随着4株PA与MDR-KP8距离的增加,MDR-KP8菌落面积也在增加,而PA菌落面积未发生明显变化;定量结果显示4株PA共培养分泌的绿脓素和鼠李糖脂含量均多于单独培养时的含量.绿脓素对MDR-KP8最小抑菌浓度为128 μg/mL;经绿脓素处理后,上清液中碱性磷酸酶、核酸、蛋白质等物质含量增加,蛋白质的二级结构发生变化.结论 PA与MDR-KP8间存在拮抗关系,PA分泌的绿脓素通过破坏细菌细胞壁,破坏蛋白质的二级结构,从而抑制MDR-KP8的生长繁殖.
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关键词
多重耐药肺炎克雷伯菌铜绿假单胞菌拮抗作用绿脓素细胞膜Multidrug-resistant Klebsiella pneumoniaePseudomonas aeruginosaAntagonismPyocyaninCell membrane
分类号
R965.1（药理学）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1001-8689.2025.02.013
发布时间
2025-03-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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