换一批Penicillium sp.MYA5中microperfuranone聚酮合酶基因在构巢曲霉中的异源表达
Heterologous expression of the microperfuranone PKS from Penicillium sp.MYA5 in Aspergillus nidulans
摘要目的 本研究旨在通过基因挖掘与异源表达提高极地内生真菌Penicillium sp.MYA5中抗菌化合物microperfuranone的产量,并验证其生物活性.方法 基于基因组测序数据,利用antiSMASH分析预测生物合成基因簇;克隆聚酮合酶基因mfpksA,构建重组质粒pYTU-mfpksA,通过酵母和大肠埃希菌转化筛选阳性克隆;将重组质粒导入Aspergillus nidulans LO8030,经CD-山梨醇平板筛选获得重组菌株A.LO8030::P.MYA5 mfpksA;重组菌株经液体发酵后,采用HPLC分离化合物,结合NMR和质谱鉴定结构;通过微量肉汤稀释法测定microperfuranone对病原菌的最小抑菌浓度(MIC).结果 成功从异源表达菌株分离得到目标化合物microperfuranone,其产量相较于MYA5菌株提高了约3.88倍.抗菌活性表明,对Fusarium oxysporum和Vibrio harveyi的MIC均为16 μg/mL,对F.oxysporum的抑菌活性显著优于氯霉素.结论 通过异源表达策略实现了microperfuranone的增产,证实基因簇挖掘与异源表达在天然产物开发中的有效性.该化合物对植物病原菌的显著抑制活性,为极地微生物资源的抗菌应用提供了理论依据.
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关键词
MicroperfuranonePenicillium sp.PKS异源表达聚酮类化合物MicroperfuranonePenicillium sp.PKSHeterologous expressionPolyketide compounds
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1001-8689.2025.04.003
发布时间
2025-06-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家重点研发计划（No.2022YFC2804105）
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