摘要目的 基于肝癌HepG2细胞的二维(2D)和三维(3D)培养模型,研究红树林植物红树根际土壤放线菌Streptomyces parvulus A-30发酵提取物中的化学成分放线菌素D(Act D)抑制肝癌HepG2细胞增殖的抑制作用,并初步探讨其作用机制.方法 用不同浓度Act D处理HepG2细胞,采用CCK-8法检测其对2D培养的HepG2细胞增殖的影响;以Matrigel基质胶为基质材料建立体外HepG2细胞3D培养模型,采用MTT法测得其对3D培养的HepG2肿瘤模型的增殖影响;采用细胞集落形成法检测其对HepG2的细胞集落形成能力;采用Transwell迁移、划痕实验检测其对HepG2的细胞的迁移能力影响;采用细胞周期实验检测其对HepG2的细胞周期是否产生阻滞;采用Annexin V/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡;采用Western blot实验检测β-catenin的表达水平.结果 CCK-8结果显示Act D对HepG2细胞增殖具有显著抑制作用,具有剂量依赖性,24 h的IC50为(2.83±0.24)μmol/L;MTT法测Act D对HepG2体外3D肿瘤模型同样具有显著抑制作用,但2D培养比3D培养的增殖率更低;细胞集落形成实验显示,Act D显著降低细胞集落形成;细胞划痕与Transwell迁移实验,显示Act D显著降低HepG2细胞迁移能力,存在剂量依赖性(P<0.01);流式细胞术检测细胞周期,结果显示Act D阻滞HepG2细胞周期于S期(P<0.01);流式细胞术检测细胞凋亡,结果显示Act D诱导细胞凋亡呈现剂量依赖性(P<0.01);Western Blot实验显示,Act D显著抑制其细胞内的β-catenin的表达水平.结论 Act D可以抑制2D和3D培养的HepG2细胞增殖,能够抑制HepG2细胞集落、迁移、凋亡、阻滞周期于S期,其作用机制可能与Wnt/β-catenin信号通路相关.