摘要目的 在丝状真菌构巢曲霉(Aspergillus nidulans)中异源生产绿僵菌素类化合物,为建立绿色高效的生物合成方法奠定基础.方法 在罗伯茨绿僵菌(Metarhizium robertsii)基因组中PCR扩增绿僵菌素生物合成基因dtxS1和dtxS2的DNA序列,利用酵母组装法构建异源表达载体,通过PEG介导的原生质体转化法将载体导入构巢曲霉LO8030底盘菌中.利用乙酸乙酯萃取转化子培养物并获得粗提物,利用LC-MS确定绿僵菌素类化合物的分子量.结果 参与绿僵菌素生物合成的非核糖体多肽合成酶基因dtxS1和细胞色素P450基因dtxS2可以直接在丝状真菌构巢曲霉底盘菌中异源表达.由于底盘菌中存在绿僵菌素生物合成基因簇中dtxS3和dtxS4的同源序列,故仅表达dtxS1和dtxS2就能产生绿僵菌素类化合物,且其种类多于罗伯茨绿僵菌野生型产生的.结论 丝状真菌构巢曲霉可成功异源表达绿僵菌素生物合成基因dtxS1和dtxS2,并产生一系列绿僵菌素类化合物.
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