摘要目的 建立一种基于同位素内标的儿童患者血浆多西环素浓度液相色谱串联质谱测定方法,并进行临床应用.方法 血浆样本经乙腈:水=3∶1(体积比)沉淀蛋白后,以多西环素-[d3]为内标,采用液相色谱串联质谱进行血药浓度测定.色谱柱为C18色谱柱(Eclipse Plus C18色谱柱,2.1mm×100mm,3.5 μm);流动相A为0.1％甲酸水溶液,B为0.1％甲酸乙腈溶液,梯度洗脱,流速0.4 mL/min,柱温30 ℃,进样量1 μL,总分析时间为6 min.质谱采用电喷雾离子源正离子模式以及多反应监测模式扫描,多西环素和多西环素-[d3]的定量和定性离子对分别为445.15→428.15、445.15.15→321.10和449.15→432.15、449.15→324.15.参照临床质谱方法学开发相关指南和共识以及《中国药典》从特异性、准确度、精密度、线性、基质效应等方面对方法进行性能验证.前瞻性收集临床使用多西环素的儿童患者血常规检测剩余血浆标本进行多西环素浓度测定,对多西环素在肺炎支原体感染的儿童患者的体内过程进行初步探索.结果 血浆样品中多西环素在0.0625～10 mg/L线性关系良好,标准曲线为Y=1.344X+0.016(r=0.9995).在不同质控水平下,方法的准确度为94.14％～106.67％,批内及批间CV为0.50％～7.54％.正常血浆基质、5％溶血血浆基质、高脂血浆基质不影响多西环素血药浓度测定.多西环素模拟血浆样品短期存放稳定性较好.共前瞻性收集、检测符合要求的33例儿童患者的临床剩余标本43份,年龄为(7.9±2.0)岁,体重(28.4±11.7)kg,多西环素血药浓度为0.45～5.06 mg/L,均在标曲的线性范围内.使用多西环素注射液治疗肺炎支原体感染患儿的Cmax为(3.9±1.3)mg/L.结论 本研究建立的基于同位素内标的儿童患者血浆多西环素液相色谱串联质谱浓度测定方法简单快捷,分析性能符合方法学要求,所需要的样本用量少,可用于儿童患者多西环素药代动力学研究和日常血药浓度检测.