壳聚糖作载体的神经干细胞移植修复脑损伤研究

The therapeutic effects of transplanting NSCs combined with the chitosan porous scaffold on injuried brain

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摘要目的:探讨壳聚糖作载体的NSCs移植及NGF的应用对大鼠TBI的修复作用.方法:用低温冷冻干燥法制备壳聚糖多孔支架.将从鼠胚前脑中分离的NSCs进行扩增,并标记BrdU.Feeney法制备SD大鼠TBI模型,随机分为3组:损伤对照组清创后不做移植;NSCs+支架移植组行壳聚糖作载体的NSCs移植;NSCS+支架+NGF移植组行壳聚糖作载体的NSCs移植,并在其中加入NGF.术后3个月在损伤区或移植区注射BDA追踪剂,行避暗回避和跳台试验.脑切片行Nissl染色、BrdU与NF-200免疫荧光双标及BDA组化染色.结果:两移植组的认知功能较损伤对照组明显改善,含NGF的移植组改善更加显著.Nissl染色见损伤对照组创伤区形成烧杯状空洞、海马萎缩变形.而两移植组创伤区有移植物填充并与宿主整合,创伤侧海马萎缩变形不明显;两移植组在移植区均可见BrdU与NF-200免疫荧光双标细胞,含NGF移植组中的双标细胞数量多、胞体大、突起多且长;BDA组化染色显示两移植组移植区内的细胞突起已延伸至宿主脑组织,含NGF的移植组向宿主脑组织延伸的突起较多.结论:大鼠TBI后行壳聚糖作载体的NSCs移植,可以改善大鼠的认知功能,NSCs可以向神经元分化并与宿主脑组织建立联系,NGF-对其具有促进作用.