肌肽通过激活Nrf2/ARE信号通路改善OGD/R诱导星形胶质细胞损伤

Carnosine protects OGD/R-induced astrocyte injury via Nrf2/ARE signaling pathway

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摘要目的探讨肌肽对缺糖缺氧/复糖复氧(OGD/R)引起星形胶质细胞(astrocyte,AS)损伤的保护作用,并阐明其机制.方法分离新生24hSD大鼠大脑皮质,培养并纯化AS后,随机分为对照组、模型组、OGD/R+肌肽组(1、3、9 mmol/L).倒置显微镜观察细胞形态;免疫荧光GFAP染色法测定细胞纯度;噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率;比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)的漏出率;Hoechst 33258染色法检测细胞凋亡;流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)含量;免疫荧光检测Phospho-Nrf2(S40)的入核水平;Western blotting法检测 Nrf2 总蛋白以及 Phospho-Nrf2(S40)蛋白表达;qPCR法检测 HO-1、NQO1 mRNA含量.结果与对照组相比,模型组细胞活力明显降低(P＜0.01),LDH漏出及细胞凋亡率显著增加(P＜0.01),细胞内ROS生成明显增加(P＜0.01),AS核内Phospho-Nrf2(S40)含量及其下游产物HO-1、NQO1 mRNA表达量下调(P＜0.01).与模型组相比,OGD/R+肌肽组(1、3、9 mmol/L)细胞活力明显升高(P＜0.01),LDH漏出及细胞凋亡率降低(P＜0.01),细胞内ROS生成不同程度减低(P＜0.01),AS核内Phospho-Nrf2(S40)含量及其下游产物HO-1、NQO1mRNA表达量上调(P＜0.01).结论肌肽可通过抑制OGD/R诱导ROS释放,激活Nrf2-ARE通路,进而增强其下游抗氧化酶HO-1、NQO1 mRNA的表达,对AS发挥保护作用.