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蛋白酶体抑制剂对星形胶质细胞周期素D1和周期素依赖性激酶4表达的影响

Effects of Proteasome Inhibitor on the Expression of Cyclin D1 and CDK4 in Cultured Astrocytes

摘要目的:研究蛋白酶体抑制对体外培养的星形胶质细胞周期素D1(cyclin D1)和周期素依赖性激酶4(CDK4)表达的影响.方法:SD乳鼠皮质星形胶质细胞原代培养,并纯化鉴定;予不同浓度(2和4 μmol·L-1)的蛋白酶体抑制剂(lactacystin)对第二代星形胶质细胞进行短期(12 h)急性干预处理,应用免疫荧光及Western blot检测星形胶质细胞cyclin D1和CDK4表达的水平.结果:纯化传代的皮质星形胶质细胞经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫荧光鉴定,其阳性率可达99%;lactacystin 2和4μmol·L-1可诱导星形胶质细胞cyclinD1和CDK4表达的下降,与对照组相比差异有显著统计学意义(P<0.01).结论:一定程度蛋白酶体活性抑制可诱导培养的星形胶质细胞cyclin D1和CDK4表达的减少,从而影响胶质细胞细胞周期,促进胶质细胞分化.提示蛋白酶体功能障碍后可能通过影响胶质细胞细胞周期来参与阿尔茨海默病的病理改变.

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