换一批
换一批上调LRIG1对胶质瘤U251细胞侵袭、迁移的影响
Effect of up-regulation of LRIG1 on invasion and migration of glioma U251 cells
摘要目的 探讨上调LRIG1表达对胶质瘤U251细胞侵袭及迁移的影响.方法 体外培养U251细胞,应用Lipofectami-neTM2000试剂盒将质粒pLRIG1-GFP(pLRIG1-GFP组)及其空载pEGFP-N1质粒(pEGFP-N1组)转染U251细胞,G418挑选具有抗性的细胞并扩增,以供进一步实验.另选择不转染任何质粒U251细胞作为空白对照组.qRT-PCR、免疫印迹法检测LRIG1及细胞上皮-间充质转化(EMT)标志蛋白SNAI2、E-cadherin、N-cadherin和vimentin的mRNA和蛋白表达;应用Transwell小室实验检测U251细胞侵袭和迁移能力.结果 成功构建高表达LRIG1的胶质瘤U251细胞,荧光显微镜下可见细胞散发绿色荧光.pLRIG1-GFP组LRIG1 mRNA及蛋白表达水平明显高于pEGFP-N1组和空白对照组(P＜0.05),而后两组之间均无统计学差异(P＞0.05).pLRIG1-GFP组侵袭和迁移细胞数明显低于pEGFP-N1组和空白对照组(P＜0.05),而后两组之间均无统计学差异(P＞0.05).pLRIG1-GFP组SNAI2、N-cadherin、vimentin mRNA及蛋白表达水平明显低于pEGFP-N1组和空白对照组(P＜0.05),而E-cadherin mRNA和蛋白表达水平明显高于pEGFP-N1组和空白对照组(P＜0.05);后两组之间均无统计学差异(P＞0.05).结论 上调LRIG1,抑制U251细胞侵袭和迁移,其机制可能与调控细胞EMT过程有关.
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