换一批
换一批摘要目的:观察mi R-150对药物代谢酶CYP3A4的调控作用.方法:用不同浓度游离长链脂肪酸(FFA)刺激张氏肝细胞,使之成为脂肪变性肝细胞.通过荧光定量PCR和Western blot测定CYP3A4 m RNA和蛋白表达以及mi R-150表达.生物信息学分析并构建野生型CYP3A4 3'-UTR双荧光素酶报告载体,与mi R-150模拟物共转染.另外,在张氏肝细胞和脂肪变性肝细胞中分别转染mi R-150模拟物和抑制剂,检测CYP3A4 m RNA和蛋白表达.结果:张氏肝细胞经1 mmol/L FFA诱导24 h后,与对照组相比,脂肪变性肝细胞中CYP3A4 m RNA和蛋白表达均显著下降(P＜0.05),mi R-150表达上升(P＜0.05).经生物信息学分析发现CYP3A4为mi R-150的靶基因,转染质粒和mi R-150模拟物后,荧光活性下降.mi R-150模拟物可使CYP3A4 m RNA表达呈浓度梯度下降(P＜0.05),也可使CYP3A4蛋白表达下降;mi R-150抑制剂使CYP3A4 m RNA表达上升(P＜0.05).结论:mi R-150可直接与CYP3A4的3'-UTR结合,进而直接调控CYP3A4的表达.
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分类号
R965.2
DOI
10.12092/j.issn.1009-2501.2018.07.005
发布时间
2019-08-06
基金项目
湖南省教育厅科学研究项目资助
湖南省教育厅科学研究项目资助
国家自然科学基金
新型药物制剂研发湖南省重点实验室培育基地资助
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