鸢尾素通过NF-κB和JNK信号通路减轻屋尘螨诱导的气道上皮细胞炎症及凋亡的实验研究

Experimental study of irisin alleviates house dust mite-induced airway epithelial cells inflammation and apoptosis via the NF-κB and JNK signa-ling pathways

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摘要目的:探索鸢尾素(irisin)对屋尘螨(HDM)诱导的人支气管上皮细胞(16HBE)的炎症和细胞凋亡的影响.方法:用含10％胎牛血清的RP-MI1640培养基培养人支气管上皮细胞(16HBE),待细胞长至85％时血清饥饿处理12 h,随后用不同浓度的HDM(0、400、800、1200 U/mL)刺激细胞24 h.用活性氧(reactive oxygen species,ROS)试剂盒检测各组细胞ROS水平,qPCR法检测各组细胞白介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平.用20 nmol/L irisin预处理16HBE细胞2 h后接着用800 U/mL HDM处理24 h.活性氧试剂盒检测irisin对HDM诱导的细胞ROS产生的影响;qPCR法检测irisin对HDM诱导的炎症因子TNF-α及IL-6表达的影响;Western blot检测细胞内P65 NF-κB及JNK MAPK蛋白磷酸化水平,同时检测细胞内促凋亡蛋白cleaved-caspase3、BAX及抗凋亡蛋白BCL-XL的水平.结果:与对照组相比,不同浓度HDM(400、800、1200 U/mL)刺激16HBE细胞24 h后,细胞内ROS水平升高(P<0.05),TNF-α及IL-6表达水平也升高(P<0.05).与单用HDM处理组相比,irisin预处理的16HBE细胞内ROS水平下降(P<0.05),同时细胞内炎症因子TNF-α 及IL-6表达减少(P<0.05);irisin预处理组抗凋亡蛋白BCL-XL表达增加(P<0.05),同时促凋亡蛋白cleaved-caspase3、BAX的表达减少(P<0.05);与对照组相比,HDM干预后细胞P65 NF-κB及JNK蛋白磷酸化水平增加(P<0.05),而irisin下调了P65 NF-κB及JNK蛋白磷酸化水平(P<0.05).结论:鸢尾素可有效改善HDM诱导的16HBE细胞的炎症和细胞凋亡,该保护作用可能与其抑制NF-κB和JNK MAPK信号通路有关,鸢尾素可能是治疗肺部炎症的潜在药物.