千金子制霜前后提取物在体外对人正常肝细胞LO2的毒性作用研究
Toxicity of extracts of Semen Euphorbiae before and after frosting on LO2 cells in vitro
摘要目的 比较千金子制霜前后提取物对LO2细胞毒性的影响并探究千金子制霜减毒的作用机制.方法 将人肝LO2细胞分为7组:千金子生品低、中、高3个剂量组、千金子霜品低、中、高3个剂量组和阴性对照组.将细胞培养48 h后,分别予以100,200,400μg·mL-1的千金子生品、千金子霜品供试品溶液和等体积的无血清细胞培养液,各组设置3个复孔.分别用PI染色法和Annexin V-FITC/PI双重染法来检测细胞周期和凋亡情况,试剂盒法检测乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)和Na+-K+-ATP酶的活力.结果 阴性对照组、千金子生品低、高2个剂量组、千金子霜品低、高2个剂量组的细胞G2/M期比例依次为(22.47±2.29)%,(13.63±0.88)%,(6.12±0.83)%,(18.03±0.73)%和(9.88±0.75)%;这5组总凋亡率依次为(3.87±0.12)%,(9.93±0.05)%,(12.80±0.28)%,(6.90±0.08)%和(9.73±0.09)%.阴性对照组、千金子生品低、中、高3个剂量组、千金子霜品低、中、高3个剂量组的LDH活力依次为(21.66±1.78),(257.77±13.09),(452.44±10.80),(798.65±8.72),(145.16±5.65),(238.10±4.85)和(495.56±5.16)mU·mL-1;这7组的SOD活力依次为(17.03±0.41),(8.28±0.35),(6.01±0.37),(2.89±0.27),(12.87±0.21),(10.58±0.24)和(7.71±0.44)U·mg-1;这7组的Na+-K+-ATP酶活力依次为(15.84±0.54),(8.47±0.66),(7.00±0.13),(3.64±0.17),(12.88±0.40),(10.79±0.22)和(8.45±0.13)U·mg-1.上述指标,千金子生品低、中、高3个剂量组与阴性对照组相比,差异均有统计学意义(均P<0.01);千金子霜品3个剂量组与千金子生品3个剂量组相比,差异均有统计学意义(均P<0.01).结论 千金子制霜后可能通过减轻细胞氧化损伤,降低细胞膜通透性,改善肝细胞功能损伤,减少细胞凋亡来降低体外肝毒性.
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