换一批用HFCF-UF联合HPLC法测定血浆中万古霉素游离浓度
Determination of free vancomycin concentration in plasma by HPLC after processed with HFCF-UF
摘要目的 建立人血浆中万古霉素游离浓度的测定方法,并用于临床治疗药物监测(TDM).方法 采用中空纤维离心超滤(HFCF-UF)分离血浆中的游离万古霉素,HPLC法进行浓度测定.色谱柱:Diamonsil C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm);柱温:30℃;流动相:甲醇-0.05 mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液(pH 3.0)=17:83(v:v);流速:1.0 mL·min-1;检测波长:236 nm;进样量:20μL;内标:去甲万古霉素.考察方法的专属性、线性关系、精密度、回收率、稳定性,并对患者的血浆样本进行测定.结果 人血浆中万古霉素游离浓度在0.25～50μg·mL-1呈线性关系,标准曲线方程Y=2.77×10-2X-8.00×10-3(R2=0.9949);日内和日间精密度的RSD值均小于10％,万古霉素的相对回收率和绝对回收率分别为95.10％～101.00％和88.41％～101.20％,内标绝对回收率96.51％;血浆样本反复冻融3次或-40℃下保存7 d,处理后样本室温下放置6 h、12 h稳定性良好.20例患者的万古霉素游离浓度为0.99～38.51μg·mL-1,蛋白结合率为15.25％～74.46％.结论 本研究所建立的HPLC方法简便易行、准确度高,适用于临床标本中万古霉素游离浓度的测定.
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