换一批用蛋白质印迹评价GAPDH与β-actin作为Skp2内参蛋白的研究
Evaluation of GAPDH and β-actin as internal reference proteins of Skp2 by Western blot
摘要目的 确定用蛋白质印迹(WB)技术研究细胞S期激酶相关蛋白2(Skp2)时适宜的内参蛋白.方法 选取多种人源肿瘤细胞系,通过瞬时转染shRNA质粒下调细胞内Skp2蛋白水平,用甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)与β-肌动蛋白(β-actin)作为内参蛋白进行WB检测,分析GAPDH、β-actin、Skp2的相对表达水平及相互关系.结果 细胞内Skp2相对表达水平发生改变时,对于人非小细胞肺癌细胞H1299(1.32 × 106±7.86 × 104)、人宫颈癌细胞HeLa(6.59 ×106±1.79×106)和人肝癌细胞 HepG2(3.13 × 106±2.87 × 105)的GAPDH相对表达水平均发生明显变化(均P＜0.05).相关性结果显示:对于人非小细胞肺癌细胞 A549(R=0.825 8)和 H1299(R=0.906 2),Skp2 与 GAPDH相对表达水平均存在一定的相关性(均P＜0.05).结论 β-actin更适合作为研究Skp2蛋白WB实验的内参蛋白.
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关键词
内参蛋白β-肌动蛋白甘油醛-3-磷酸脱氢酶细胞S期激酶相关蛋白2相对表达水平蛋白质印迹internal reference proteinβ-actinglyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenaseS-phase kinase-associated protein 2relative expression levelWestern Blot
分类号
R97（药品）
栏目名称
DOI
10.13699/j.cnki.1001-6821.2024.06.013
发布时间
2024-04-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（81802622）
浙江省自然科学基金资助项目（LY18H160067）
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