苦杏仁苷对糖尿病肾病大鼠肾小管上皮细胞损伤的影响
Effects of amygdalin on renal tubular epithelial cell injury in diabetes nephropathy rats
摘要目的 研究苦杏仁苷对糖尿病肾病(DKD)大鼠肾小管上皮细胞损伤及腺苷酸活化蛋白激酶/哺乳动物西罗莫司靶蛋白(AMPK/mTOR)通路的影响.方法 将SD大鼠分为空白组、模型组、苦杏仁苷低剂量组(3 mg·kg-1)、苦杏仁苷高剂量组(10 mg·kg-1)、Compound C 组(2.5 mg·kg-1 AMPK 抑制药Compound C)、苦杏仁苷高剂量+Compound C组(10 mg·kg-1苦杏仁苷+2.5 mg·kg-1 Compound C),每组10只.除空白组外,其余各组大鼠用连续喂养高脂高糖饲料+腹腔注射60 mg·kg-1 1%链脲佐菌素(STZ)方法进行DKD造模,造模成功后第2天给予相应药物处理,每天1次,持续给予8周,空白组、模型组均给予等体积0.9%NaCl.用二喹啉甲酸(BCA)法检测大鼠24 h尿蛋白含量,用血糖仪检测大鼠空腹血糖,用全自动生化分析仪检测大鼠血肌酸酐和血尿素氮水平,用原位末端标记法(TUNEL)染色检测大鼠肾组织细胞凋亡情况,用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素1 β(IL-1 β)水平,用蛋白质印迹(Western Blot)法测定大鼠肾组织AMPK/mTOR通路、自噬及凋亡蛋白的表达水平.结果 空白组、模型组、苦杏仁苷低剂量组、苦杏仁苷高剂量组、Compound C组和苦杏仁苷高剂量+Compound C组的肾小管损伤评分分别为(0.43±0.05)、(3.26±0.24)、(1.92±0.14)、(0.73±0.06)、(3.81±0.29)和(1.78±0.12)分,细胞凋亡率分别为(5.23±0.41)%、(26.35±2.17)%、(16.76±1.42)%、(6.13±0.53)%、(35.68±3.08)%和(15.92±1.15)%,磷酸化 mTOR(p-mTOR)/mTOR 分别为0.31±0.03、0.80±0.08、0.60±0.06、0.38±0.04、0.92±0.08 和 0.69±0.07,磷酸化 AMPK(p-AMPK)/AMPK 分别为 0.91±0.08、0.39±0.04、0.56±0.06、0.88±0.07、0.23±0.02和0.52±0.05.模型组的上述指标与空白组、苦杏仁苷低剂量组、苦杏仁苷高剂量组相比,在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.05);苦杏仁苷高剂量组的上述指标与苦杏仁苷高剂量+Compound C组相比,在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 苦杏仁苷可通过激活AMPK/mTOR信号通路,从而减轻DKD大鼠肾小管上皮细胞损伤.
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