摘要目的 建立一种高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)法快速测定重症感染患儿微量血浆/血清中利奈唑胺和万古霉素浓度.方法 血浆/血清10 μL经甲醇沉淀蛋白后取上清液直接进样分析,内标分别为利奈唑胺-D3和去甲万古霉素;用 Kinetex? EVO C18 柱(30.0 mm × 2.1 mm,2.6 μm)分离,以0.1％甲酸-水和0.1％甲酸-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速:0.5 mL·min-1,柱温:40℃,进样量:2μL,分析时长:2 min.电喷雾离子源正离子扫描下,用多反应监测模式进行质谱分析.考察该方法的专属性、定量下限和标准曲线、准确度和精密度、回收率、基质效应、稳定性、血清和血浆样品的交叉验证、溶血效应和高脂效应.结果 利奈唑胺、万古霉素及内标利奈唑胺-D3、去甲万古霉素的保留时间分别为1.18、1.03、1.17、1.01 min.利奈唑胺在0.2～25.6 μg·mL-1内呈良好的线性关系,回归方程是y=8.95 × 10-1x+3.49 × 10-3(r=0.997 1),定量下限为0.2 μg·mL-1;万古霉素在1～128 μg·mL-1内呈良好的线性关系,回归方程是y=3.13×10-1x+6.93×10-2(r=0.997 4),定量下限为1 μg·mL-1;批内、批间精密度的相对标准偏差(RSD)均≤9.55％.2种药物的平均提取回收率均在96.24％～104.57％;内标归一化基质因子的RSD≤7.58％;血浆和血清基质样品可交叉检测,利奈唑胺和万古霉素最高可承受的溶血程度分别为2％和5％,高脂效应均不影响2种抗菌药测定结果.样品的稳定性在试验条件下均良好.该法成功用于我院28例重症感染患儿血浆样本分析.结论 本方法所需样本量少,简单、快速、准确、稳定、应用范围广,可应用于利奈唑胺和万古霉素在儿童治疗药物监测及联合用药研究.