用HPLC-MS/MS法测定儿童微量血浆中地高辛浓度
HPLC-MS/MS method for monitoring digoxin in children with small volume of plasma
摘要目的 建立液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法检测血浆中地高辛含量,并用于患儿治疗药物监测(TDM).方法 取血浆样本10 μL经乙腈沉淀蛋白,用 Phenomenex Kinetex EVO C18(30.0 mm ×2.1 mm,2.6 μm)色谱柱分离,流动相为水(含0.05%甲酸和2 mmol·L-1乙酸铵)和甲醇,梯度洗脱,流速:0.55 mL·min-1,进样体积:30 μL,柱温:45 ℃.电喷雾离子源正离子模式,动态多反应监测(dMRM)扫描分析,离子通道分别选择为m/z 798.3→651.3(地高辛)和m/z 801.3→654.3(地高辛-d3).考察该方法的专属性、标准曲线与定量下限、准确度和精密度、提取回收率、基质效应以及稳定性.结果 地高辛及内标的保留时间均为1.39 min,地高辛在0.25~8.00 ng·mL-1线性良好,代表性的标准曲线方程为y=18.08 ×10-2x+29.71 ×10-4(r2=0.995 77),批内和批间精密度相对标准偏差均小于15%,提取回收率为91.00%~99.50%,稳定性良好,基质效应符合规定.本方法成功用于65例患儿的地高辛血药浓度测定.结论 本方法操作简便、快速、准确、专属性强,可用于患儿临床治疗药物监测.
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