羟基红花黄色素A对糖氧剥夺后bEnd.3细胞自噬作用的影响

Effects of hydroxysafflor yellow A on autophagy in bEnd.3 cells after oxygen-glucose deprivation

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摘要目的探究羟基红花黄色素A(HSYA)对糖氧剥夺(OGD)后bEnd.3细胞自噬作用的影响及机制.方法将bEnd.3细胞分为正常组(常规培养)、模型组(OGD模型)、HSYA组(OGD模型+75 μmol·L-1 HSYA)、3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3MA)抑制药组(5 mmol·L-1 3 MA+OGD 模型)、3MA+HSYA 组(5 mmol·L-1 3MA+OGD 模型+75μmol·L-1 HSYA).用 TUNEL 荧光染色法测定细胞凋亡水平;用蛋白质印迹法测定自噬、血脑屏障(BBB)相关蛋白的表达水平;用实时荧光定量聚合酶链反应法测定沉默信息调节因子1(SIRT1)、人叉头蛋白O3A(FOXO3A)mRNA的表达水平.结果正常组、模型组、HSYA组、3MA抑制药组和3MA+HSYA组中 TUNEL染色阳性细胞分别为5.00±1.00、28.00±2.00、21.00±3.00、35.33±2.51 和 29.67±2.52;微管相关蛋白 1 轻链 3-Ⅱ/-Ⅰ(LC3-Ⅱ/-Ⅰ)表达水平分别为 0.90±0.20、1.34±0.10、1.95±0.14、0.76±0.15和1.14±0.09;泛素结合蛋白P62(P62)表达水平分别为 0.99±0.02、0.60±0.02、0.38±0.01、0.67±0.04 和 0.54±0.01;闭合蛋白(Occludin)表达水平分别为 1.39±0.17、0.62±0.15、1.00±0.09、0.40±0.13和0.80±0.15;紧密连接蛋白1(ZO-1)表达水平分别为1.63±0.20、0.64±0.06、0.98±0.14、0.37±0.14 和 0.87±0.04;SIRT1 mRNA 表达为1.00±0.00、0.75±0.07、1.69±0.09、0.31±0.02 和 0.56±0.01;FOXO3A mRNA表达为 1.00±0.00、0.80±0.05、1.47±0.09、0.40±0.01 和0.62±0.09.模型组与正常组比较,HSYA组与模型组比较,3MA+HSYA组与3MA抑制药组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.001).结论 HSYA可能通过SIRT1/FOXO3A通路增强OGD后bEnd.3细胞自噬水平,抑制细胞凋亡减轻BBB损伤.

作者 戴瑶瑶 ^[1] 舒梦琦 ^[1] 魏汝恒 ^[1] 苗珠月 ^[1] 丁智斌 ^[2] 马东 ^[3] 黄建军 ^[3] 宋丽娟 ^[4] 马存根 ^[1] 学术成果认领

作者单位 山西中医药大学神经生物学研究中心,国家中医药管理局多发性硬化益气活血重点研究室,山西晋中 030619 ^[1] 山西白求恩医院神经内科,山西太原 030032 ^[2] 国药同煤集团总医院神经外科,山西大同 037003 ^[3] 山西中医药大学神经生物学研究中心,国家中医药管理局多发性硬化益气活血重点研究室,山西晋中 030619;山西医科大学细胞生理学省部共建教育部重点实验室,山西太原 030001 ^[4]

关键词羟基红花黄色素A 糖氧剥夺自噬 bEnd.3细胞沉默信息调节因子1/人叉头蛋白O3A通路 hydroxysafflor yellow A oxygen-glucose deprivation autophagy bEnd.3 cells sirtuin-1/forkhead box protein O3 a pathway

分类号 R28

栏目名称 临床与基础桥接研究

DOI 10.13699/j.cnki.1001-6821.2024.12.008

发布时间 2024-07-09

基金项目

国家自然科学基金 国家自然科学基金 中国博士后科学基金面上资助项目 山西省科技创新人才青年团队基金资助项目 山西省卫健委医学科技领军团队基金资助项目 山西省研究生科研创新基金资助项目 山西中医药大学科技创新团队基金资助项目 山西中医药大学基地平台开放课题资助项目 山西中医药大学学科建设经费 山西中医药大学研究生教育创新计划基金资助项目