重组人神经肽Y受体Y2融合蛋白的表达、纯化及其生物信息学分析研究

Study on expression, purification and bioinformatic analysis of recombinant human neuropeptideY Y2 receptor

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摘要目的在大肠杆菌中表达人神经肽Y Y2受体,并对之进行纯化、鉴定及生物信息学分析.方法取已构建好且经测序确认无误的重组质粒pET28a-Y2转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达融合蛋白,并经SDS-PAGE检测和Western 印迹鉴定,表达产物包涵体经Ni~(2+)-NTA亲和层析纯化.然后利用相关在线软件进行生物信息学分析Y2受体蛋白.结果经IPTG诱导含有pET28a-Y2重组质粒的DE3菌,表达出重组人Y2融合蛋白.重组蛋白经Ni~(2+)-NTA亲和层析进行纯化后,得到了较高纯度的融合蛋白.经相关在线软件分析后获得了Y2受体的相关生物学特性.结论重组质粒pET28a-Y2在大肠杆菌DE3中成功表达,亲和层析纯化后获得较高纯度融合蛋白,并对Y2受体蛋白的生物学特征进行了预测,为进一步研究其生物学功能及其抗体的研制奠定了基础.

作者丁克祥 ^[1] 董萍 ^[2] 郑永晨 ^[3] 杨永鹏 ^[2] 朱晓亮 ^[4] 韩晋云 ^[5] 单志新 ^[6] 丁宇 ^[7] 丁振华 ^[8] 学术成果认领

作者单位南方医科大学科研部,广东,广州,510515 ^[1] 大连董萍美容整形医院 ^[2] 吉林大学附属第二临床医院 ^[3] 南方医科大学附属南方医院 ^[4] 南方医科大学研究生学院 ^[5] 南方医科大学附属华南医院 ^[6] 华中科技大学同济医学院附属同济医院 ^[7] 南方医科大学公共卫生与热带医学学院 ^[8]

关键词人神经肽Y Y2受体融合蛋白包涵体纯化生物信息学 NeuropeptideY Y2 receptor Fusion protein Inclusion body Purification Bioinformatics

主题词蛋白(Egg White)人(Persons)计算生物学(Computational Biology)研究(Research)包涵体(Inclusion Bodies)

分类号 R392.11 R341.6

栏目名称 临床研究

DOI 10.3969/j.issn.1005-9202.2009.19.002

发布时间 2010-03-19