α7尼古丁受体mRNA表达抑制对SH-SY5Y细胞氧化应激水平的影响
Influence of inhibiting α7 neuronal nicotinic acetylcholine receptor mRNA on lipid peroxidation in SH-SY5Y cells
摘要目的 探讨通过RNA干扰技术抑制神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y细胞)中α7尼古丁乙酰胆碱受体(nAChR)基因表达后细胞氧化应激水平的变化,以了解该受体的神经保护作用.方法 SH-SY5Y细胞转染针对α7 nAChR的小分子干扰RNA,Real-time PCR法检测转染细胞中α7nAChR mRNA水平蛋白质印迹方法检测蛋白表达水平;并用Aβ1 ~42处理培养细胞,比色法测定细胞脂质过氧化产物水平、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性.结果 转染siRNA后,α7 nAChR mRNA水平和蛋白表达水平分别降低了81.7%和76.9%;细胞脂质过氧化水平升高38.4%;SOD和GSH-PX活性分别降低30.3%和21.1%.用Aβ1 ~42处理细胞后氧化应激水平升高,且转染siRNA后能增强Aβ的神经毒性作用.结论 α7 nAChR基因表达抑制后能增强细胞氧化应激水平,同时增强Aβ的神经毒性作用.
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