换一批绿脓杆菌ATCC9027外毒素PE40基因克隆与系统发育分析
Cloning and phylogenetic analysis of PE40 gene of pseudomonas aeruginosa ATCC9027 exotoxin
摘要目的 为获得用于构建免疫毒素弹头的毒素蛋白基因,克隆绿脓杆菌外毒素PE40基因.方法 PCR扩增ATCC9027外毒素PE40基因,纯化PCR产物与T载体连接后转染感受态大肠杆菌JM109,蓝白斑筛选阳性克隆,HindⅢ酶切和测序鉴定阳性克隆.将ATCC9027的PE40基因进行blast搜索,以Genbank中所有的绿脓杆菌外毒素PE40基因为内群,以白喉毒素基因为外群进行系统发育分析.结果 PCR产物为1 098 bp.与PA103相比,ATCC9027外毒素PE40基因有14个碱基的突变,导致外毒素蛋白8个氨基酸的突变.系统发育树显示绿脓杆菌外毒素PE40基因形成单系群,ATCC9027和ATCC927853的亲缘关系最近.结论 ATCC9027外毒素关键位点的氨基酸未发生突变,获得了用于构建免疫毒素弹头的毒素蛋白基因PE40.
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关键词
绿脓杆菌外毒素(PE)除去细胞识别部分Ia的绿脓杆菌外毒素(PE40)克隆Pseudomonas aeruginosa exotoxin (PE)Pseudomonas aeruginosa exotoxin structural gene deletion of its native celling binding domain Ia (PE40)Clone
分类号
Q933（微生物学遗传学）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1005-9202.2013.19.050
发布时间
2013-11-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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